Localización subcelular diferencial de BRCA1 y algunas de sus mutantes en cáncer de mama: participación de la proteína BARD1

En Chile el cáncer de mama es la primera causa de muerte por cáncer en mujeres. Mutaciones en los genes BRCA1 y BRCA2 otorgan un alto riesgo para el desarrollo de esta enfermedad. En células normales BRCA1 se localiza principalmente en el núcleo donde participa en la reparación de quiebres en la doble hebra de DNA. BRCA1 es retenido en el núcleo mediante interacción con la proteína BARD1.

El objetivo de este trabajo fue determinar si mutaciones en el gen BRCA1 que alteran su interacción con BARD1 generan la localización citoplasmática de BRCA1 en tumores y en líneas celulares de mama. Se analizó la localización subcelular de BRCA1 y BARD1 en 103 tumores mediante inmunofluorescencia.

El 67% de los tumores mostraron ausencia de localización nuclear de BRCA1. Mediante secuenciación del DNA genómico se identificaron 4 mutaciones en el gen BRCA1 (c.3936C>T; c.4581C>T; c.189T>G y c.589delCT) en aquellos tumores que presentaron ausencia de BRCA1 en el núcleo. Se evaluó la co-localización nuclear de BARD1 con mutantes de BRCA1 (c.3936C>T; c.306_307insA y c.300T>G) transfectadas en la línea celular de cáncer de mama HCC1937. Las mutantes c.306_307insA y c.300T>G mostraron una disminución de la co-localización (29,3% y 27%) en relación a la interacción de BRCA1 silvestre con BARD1. Se evaluó interacción de BARD1 con las mutantes c.3936C>T y c.300T>G mediante co-inmunoprecipitación. Sólo BRCA1 c.3936C>T mostró interacción con BARD1.

Las mutaciones en BRCA1 contribuyen en la localización subcelular anormal de BRCA1, sin embargo, por sí solas no explican completamente la ausencia nuclear de BRCA1.

• Nombre: Cristóbal Herrera Cares
• Laboratorio: Genética Molecular Humana
• Mención: Biología Celular y Molecular
• Director Tesis: Pilar Carvallo